硬组织切片技术在种植牙实验中的应用
来源：江苏友博国际医疗科技有限公司 发布时间 ：2023-06-09
硬组织切片、石蜡切片和冰冻切片是病理组织学技术常用的三大切片技术之一。硬组织切片采用树脂包埋切片 ，由于包埋过程不需要脱钙，细胞细微结构形态较石蜡组织更加清晰。而随着种植牙技术的发展和普及 ，越来越多的相关实验得到开展，在实验中种植体与周围骨之间快速而稳定的骨结合是衡量种植牙成功的关键，而骨结合主要取决于种植体表面接触成骨的程度和种植体周围充足的骨量。由于种植体在传统的制片过程中的脱钙处理会破坏细胞结构，所以在此类实验中常选用硬组织切片技术，这种技术不仅能保留种植体与骨组织之间的位置关系，同时能更好的保存细胞结构。苏州堪赛尔医学检验有限公司是国内较早引进德国艾卡硬组织技术平台的公司，经过几年来的技术研究和开发，在染色技术和诊断方面形成了完整的服务体系，已经申报相关技术的发明专利三项。在江苏友博国际医疗的大动物实验中心进行了多项植介入产品（眼科 、心血管和骨科）的申报验证，现将硬组织切片技术在种植牙实验中的应用经验与同行分享 。
不脱钙种植体骨切片的制备与染色 带种植体的标本进行修切暴露出少许种植的螺纹为宜 ，标本大小约5mm×15mm×10mm，在脱水仪中用70％~100％的乙醇溶液进行梯度脱水 。脱水完成后将组织块置入塑料模具，在光固化包埋机中做有机玻璃浸透包埋 。完成聚合反应后 ，使用黏接剂把有机玻璃包埋标本黏合于载玻片上，再真空吸附于切片机夹具上，标本颊舌向切成150μm厚的切片 ，再把切片吸附于磨片机上使用各级砂纸进行自动磨片 ，将其磨至预定的厚度(30μm)，*后再用细砂纸对切片表面进行抛光，整个过程要有测量控制系统进行控制 ，*终制作出作厚度约为30μm的带种植体的光滑骨切片 。将切磨好的骨切片使用双蒸水进行超声清洗10min，自然干燥后用H&E和亚甲基蓝—酸性品红染色。
H&E染色可以观察新生骨组织与植入物的贴合情况 ，以及其他细胞生长情况；亚甲基蓝-酸性品红染色可以观察新生骨范围以及成熟情况 ，可以利用相关软件进行新生骨面积测量。
讨论 因为在类似的实验中种植体质地较为坚硬 ，使得常规的石蜡切片技术无法达到实验要求，所以硬组织切片成为了*佳的切片方法 。硬组织切片技术不需要脱钙，因此保持了骨组织原有结构和成分，保持原有种植体与骨组织的位置关系 ，观测组织结构及成分时由于维持原有状态，诊断和测量结果更能如实反应种植牙与周围骨组织的关系。硬组织切片技术是医疗器械CRO领域的瓶颈技术 ，由于该技术相关的仪器设备和试剂耗材均依赖进口 、价格昂贵 、技术难度高及德国供应商不提供技术培训等缺点，限制了这项技术在国内的推广和应用。江苏友博国际医疗硬组织技术实验室历时多年研发，已经从技术操作、试剂配置、切片角度调整、形态观察、形态计量 、特殊染色、免疫组化和分析报告撰写等多个环节构成了牙种植体动物实验-硬组织切片技术-病理诊断报告等完整的服务体系。由于硬组织切片技术在脱水和包埋环节存在费时*长、对试剂进口的完全依赖等问题，江苏友博国际医疗的技术团队经过大量尝试和探讨，已经在实验周期方面已做到用时*少且能保证颜色效果。在特殊染色方面，本公司所开展的项目已经全面覆盖骨组织领域的各类植入实验的项目要求，所形成的诊断体系已经通过FDA和CFDA申报产品的验证。
